高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/24 09:29:11

高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
高保真酶的PCR结果
我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,

高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
EX-TAQ很容易出现杂带的,这个酶本身的BUFFER是高离子浓度.你可以试试用EXTAQ酶扩出条带后,在琼脂糖胶上切下纯化在用高保真酶扩一下,扩出来就是有产物扩不出就是非特异扩增

  TAKARA公司的高保真Taq酶效率比ExTaq差,这是一个普遍问题。你要克隆的基因又多长?如果不太长的话,可以直接用ExTaq扩增,或者ExTaq+高保真Taq酶扩增,然后多选几个克隆。我要扩的是1100左右的片段,我试试两种酶混合看看。  你试试看吧。1100bp的话,错配率也还可以接受,大不了多挑两个克隆。好的,谢谢拉...

全部展开

  TAKARA公司的高保真Taq酶效率比ExTaq差,这是一个普遍问题。你要克隆的基因又多长?如果不太长的话,可以直接用ExTaq扩增,或者ExTaq+高保真Taq酶扩增,然后多选几个克隆。

收起

可以通过其他基因PCR,或让其他人用新的酶PCR,以检验是否是酶的问题

高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢, 高保真酶的PCR结果 高保真酶PCR没有结果我用高保真酶做PCR的时候没有目的条带,但是同样的条件下用Taq酶条带就很亮,这是为什么呢? 高保真酶,PCR末端加A原理Takara的高保真酶,exTaq,有3‘-5’外切活性,说明书上又说能在pcr产物末端加A,什么原理呢?是不是在里面混了普通taq酶? 那个公司的高保真taq酶比较好用?我要做长距离PCR,然后标记做FIsh用. PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP:引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物 用takara的酵母菌DNA提取试剂盒提取rDNA,PCR后跑电泳总没结果,出现火星带,没有条带,怎么回事? PCR的高保真酶都有哪些啊? Takara PCR仪 普通的 大概多少钱? 关于PCR反应液纯化回收后再电泳的问题如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果可是每次在加样的时候 请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段. [PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带? PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带? 高保真KOD和PCR的应用有哪些不同? RT-PCR 中 反转之后 PCR部分 DNA 的用量我用2ug RNA 25ul体系做完反转后 pcr部分用TAKARA的TAq酶 参考是50ul体系:给的模板用量参考是:人基因组DNA 0.1-1ug ,大肠杆菌的10-100ng ,入DNA 0.5-5ng,质粒DNA 0.1-10ng PCR扩增图,杂带出现的原因如图,2、3泳道是我的扩增产物,2泳道所要的条带是上面较亮的那个.3泳道的亮带是我所要的.所用的酶酶为高保真酶,请问为何会出现这样的结果?怎么会有这么多杂带? PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一样的~2次PCR TaKaRa LA PCR in vitro Cloning Kit试剂盒克隆启动子,一样的困扰.联系我:nevil@126.com