作业帮哪位高人看过PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因造成的?望指教.
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/11 02:54:46
哪位高人看过PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因造成的?望指教.
哪位高人看过PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因造成的?望指教.
哪位高人看过PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因造成的?望指教.
如果最亮的带是你的目的带,那就是拖尾而不是杂带,问题不大.
要是顺便点了marker,问题很容易看出来,因为如果marker也拖尾的话,自然可以判断是电泳的问题.现在没有marker,但也首先怀疑是这个问题,原因可能有2：点样量过高（那要pcr产物量相当高）,TAE（是否用水配了胶?）或者琼脂糖有问题.
解决办法：减少点样量,点marker一起跑；同时重新配胶、换TAE,换其他牌子或批号的琼脂糖（如果此前这个琼脂糖没问题可不换）；电泳电压别太高.
如果按上述方法后marker不拖尾,但样品还拖尾,就是pcr的问题,最大的可能是模板两过高（但从你的图中看,你向后拖尾呈彗尾状,而不是呈等宽涂抹状,我觉得还是电泳问题,模板过高的可能小）.解决办法,把模板稀释100-1000倍,你的带挺亮的,应该好p.
若有疑问,欢迎继续讨论,纯属手打,欢迎采纳,祝实验顺利!
-----
又看了你图,补充点,为什么你的带在胶中是斜的?要么是胶漂歪了,要么是电泳仪有点问题,检查下你的铂金丝是不是断了或歪了……
很可能是TAE溶液太少了，我以前就跑过这样的条带，加了TAE就没问题了。
你PCR的条件是什么，模板有没有问题，退火温度是不是低了？下次最好点上marker。造成拖尾如此之严重的原因可能是缓冲液有问题，pH有没有弄错，缓冲液离子强度呢？造成目标产物位移不均一可能是你凝胶方歪了，这道问题不大，但如果PCR时退火温度太低，造成非特异扩增，哪就一定会出现象你这样的拖尾问题。...
全部展开
你PCR的条件是什么，模板有没有问题，退火温度是不是低了？下次最好点上marker。造成拖尾如此之严重的原因可能是缓冲液有问题，pH有没有弄错，缓冲液离子强度呢？造成目标产物位移不均一可能是你凝胶方歪了，这道问题不大，但如果PCR时退火温度太低，造成非特异扩增，哪就一定会出现象你这样的拖尾问题。
收起