如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 13:58:34

如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?
如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?

如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?
一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只要用这些内切酶进行酶切,然后看能否有目的基因的片段被切下来,则可以判定目的基因有没有插入.另外,在有些载体中(如T载体)目的基因是插入在某些标记基因内部的,这样如果标记基因表达正常则没有插入,如果标记基因不表达,那么则正常插入了.如T载体中的LacZ基因.

PCR或者酶切验证
PCR扩增目的基因看看有没有插入
酶切特异位点看看目的基因有没有插入

那要看商品化的质粒上带有什么样的筛选序列了,如果质粒上带有lacZ的话可以做蓝白斑筛选(白色为有质粒插入) ,当然也可以像楼上说得那样做质粒抽提然后作特异性酶切验证,即切下的片断大小是不是和你插入的目的片段大小一致。 不管哪种方法关键还是要看质粒的说明书。...

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那要看商品化的质粒上带有什么样的筛选序列了,如果质粒上带有lacZ的话可以做蓝白斑筛选(白色为有质粒插入) ,当然也可以像楼上说得那样做质粒抽提然后作特异性酶切验证,即切下的片断大小是不是和你插入的目的片段大小一致。 不管哪种方法关键还是要看质粒的说明书。

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如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因? 将目的基因与质粒结合为重组质粒和将目的基因与某种病毒结合为重组DNA都是在细胞内进行么问题的前提是对人类糖尿病的基因治疗研究 如何将目的基因和质粒结合成重组质粒 为什么目的基因都一定有质粒与它结合,重组质粒的质粒有很多类型吗? 人工合成的基因的途径一般有哪些2、如何将目的基因和质粒结合成重组质粒 不属于目的基因与载体结合过程的是不属于目的基因与载体结合过程的是A用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C将重组DNA导入受体细胞中进行扩增D 为什么载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞?如果导入受体细胞的为空质粒(目的基因没有成功结合)抗性基因仍能在受体中表达,又如何看出目的基因是否导入了呢? 质粒和目的基因的问题(急)质粒被限制酶切了一个切口,而目的基因也用相同限制酶从DNA上切下.用DNA连接酶连接时,得到的重组产物中的质粒和质粒的结合,指的是一个质粒上两个粘性末端的 在什么的作用下使目的基因与质粒结合形成重组质粒 目的基因和载体的结合二者需用限制酶切割后变为重组载体,该过程与质粒上含有() 有关 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒 基因工程原理:质粒的抗性基因有利于筛选重组DNA分子如果导入受体细胞的为空质粒(目的基因没有成功结合)抗性基因仍能在受体中表达,又如何看出目的基因是否导入了呢? 质粒上的标记基因不可用来筛选含重组DNA的细胞和转基因动、植物? 这里标记基因是目的基因吗?看图.说要检验质粒是否成功重组有目的基因,就看能否抗四环素.但是如果质粒本生就有抗四环素的基因,就算没有成功重组不也可以抗四环素?想问标记基因和目的 质粒与目的基因构建的重组质粒在受体细胞中有哪两种存在形式 将目的基因导入大肠杆菌,有可能重组质粒进入大肠杆菌但未与大肠杆菌质粒结合么? 在基因操作中,形成重组DNA分子的阶段是?在基因操作中,形成重组DNA分子的阶段是A获取目的基因B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞D目的基因的监测和鉴定选哪个?为什么额.拜托 高中生物目的基因与质粒结合发生了剪辑互补配对,那么重组质粒导入受体细胞有没有发生碱基互补配对那?我的参考资料说没有,但我觉得有重组质粒与受体细胞的染色体结合,不就需要碱基互