在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 13:03:24

在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激?
在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激?

在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激?
这是用热激法进行的转化.以大肠杆菌为例,大肠杆菌在0摄氏度的氯化钙低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42摄氏度短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖.所以需要先冰上放置30min.

让感受态细胞和外源DNA混匀,能够充分的接触

在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激? 感受态细胞BL-21与DH5a的各自作用是什么?在进行转化时如何选择? 感受态细胞转化效率的高低与哪些因素有关? 质粒转化为什么只有一个质粒进入感受态细胞,同时进入几个质粒有可能吗?为什么?谢谢!我的具体意思是假如有A和B两种DNA片段插入到质粒中,在进行转化时,这两种质粒能进入同一个感受态细 怎样检验感受态细胞转化是否成功 表达型大肠杆菌BL21(DE3)PLySs感受态细胞转化培养BL21(DE3)PLySs感受态细胞在转化培养时,如果用SOC培养基,需要另外加氯霉素吗?如果选用BL21(DE3)感受态细胞对于PE28+载体转化表达来说,有没 转化感受态细胞时 电击法为什么比氯化钙法转化率高 谁做过酶切质粒的实验啊,制感受态细胞然后转化呢? 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为什么不加入抗生素 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为什么不加入抗生素 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验:在转化实验中,涂平板前需要在37度下振荡培养30-60min大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验:在转化实验中,涂平板前需要在37度下振荡培养30-60min,请 大肠杆菌转化的机理与感受态细胞的制备方法的研究进展(希望答案详细) 转化感受态细胞的目的是什么转化感受态细胞的前因后果 把DNA加入感受态细胞时产生泡沫有什么影响 转化感受态细胞时 ,热激后冷却时间长 会有怎样影响 感受态细胞转化时,热击后需冷却5分钟的原因或者好处是什么及原理? 在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长但是在进一步做PCR验证时(扩增目的基因),却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物 感受态因子在细菌转化中的作用?膜相关DNA接合蛋白,细胞壁自溶素,核酸酶