作业帮基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/14 12:06:50
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
首先受体细胞有三种类型,包括植物细胞、动物细胞、微生物.其中在高中选修课本三的基因工程中仅介绍了微生物的处理方法,即将大肠杆菌培养在钙离子的溶液中,使其细胞膜的通透性增加,从而使运载体进入受体细胞.具体处理方法可用百度收索“感受态细胞”.希望对你有所帮助.
如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般对细菌用一定浓度的氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性。
感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
CaCl2法：
操作：
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
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感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
CaCl2法：
操作：
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物。
2.此时，将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激（90s），细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动，并随机出现许多间隙，外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达，实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。
3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养，筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
意义：
将构建好的载体转入感受态细胞进行表达，不仅可以检验重组载体是否构建成功，最主要的是感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验，如蛋白质表达纯化等工作。
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