怎样算PCR扩增后的DNA质量

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 21:33:24

怎样算PCR扩增后的DNA质量
怎样算PCR扩增后的DNA质量

怎样算PCR扩增后的DNA质量
如果你做的是非常靠谱的绝对定量RT-PCR,可以根据标曲算.
但实际上对包括RT-PCR在内的PCR产物浓度定量,更简单、更靠谱的办法是:
1,加标准marker电泳,用照胶自动分析系统计算,可以大致定量,得其质量浓度;
2,更准的是,回收PCR产物,用紫外分光光度计准确测定其质量浓度.
“先算出模板链的质量然后用2的N-1次方算出扩增后DNA的数量相乘”,这是有误区的,实际的PCR反应不是理想的指数扩增过程,尤其是循环到了一定次数后.何况,还要考虑特异性的问题.
欢迎继续讨论,纯属手打,祝愉快!

你说的是重量还是质量?
求重量的话先算出模板链的质量然后用2的N-1次方算出扩增后DNA的数量相乘就行了…
求质量的话一般用凝胶电泳的方法看跑出的条带是否清晰就行了……

限制性内切酶 2个办法 1. 直接使用提纯试剂盒,去掉其他成分,或者跑胶依据简便、易操作的原则,目前较常用的方法是将扩增后的DNA 片段进行电泳,

RT-PCR或用紫外分光光度计测浓度